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赭曲霉素检测

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更新时间:2025-05-09  /
咨询工程师

引言

赭曲霉素(Ochratoxin)是由曲霉菌和青霉菌产生的次级代谢产物,广泛存在于谷物、咖啡豆、葡萄酒等农产品中。其中,赭曲霉素A(Ochratoxin A, OTA)毒性最强,被国际癌症研究机构(IARC)列为2B类致癌物。长期摄入污染赭曲霉素的食品可能引发肾损伤、免疫抑制及致癌风险。因此,建立、精准的赭曲霉素检测方法对保障食品安全和人类健康至关重要。本文将从检测范围、检测项目、检测方法及仪器设备等方面,系统阐述赭曲霉素检测的核心技术与应用。

检测范围

赭曲霉素的检测对象主要涵盖以下领域:

  • 谷物及其制品:如小麦、玉米、大麦等易受霉菌污染的原料;
  • 咖啡及可可制品:咖啡豆在储存过程中易滋生产毒真菌;
  • 葡萄酒与果汁:原料水果霉变可能导致赭曲霉素残留;
  • 调味品与坚果:辣椒、胡椒及坚果类产品需重点监控;
  • 动物饲料:污染物可通过食物链影响畜禽健康及肉制品安全。

检测项目

赭曲霉素检测的核心项目包括:

  • 赭曲霉素A(OTA):毒性最强且污染范围最广的主要检测目标;
  • 赭曲霉素B(OTB)及代谢产物:部分条件下OTA的降解产物;
  • 总赭曲霉素含量:结合OTA与OTB的综合风险评估;
  • 基质特异性检测:针对不同食品基质的提取与净化方法优化。

检测方法

1. 液相色谱法(HPLC)

HPLC是检测赭曲霉素的经典方法,其原理基于目标物在色谱柱中的保留时间差异。样品经乙腈-水溶液提取后,通过免疫亲和柱净化,采用荧光检测器(激发波长330 nm,发射波长460 nm)定量分析。该方法灵敏度高(检出限可达0.1 μg/kg),但需复杂的样品前处理。

2. 液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)

LC-MS/MS结合色谱分离与质谱高特异性,可同时检测多种赭曲霉素及其衍生物。该方法采用同位素内标法(如13C-OTA)校正基质效应,检出限低至0.01 μg/kg,适用于复杂基质的精准定量。

3. 酶联免疫吸附法(ELISA)

ELISA基于抗原-抗体反应,通过酶标仪测定吸光度值实现快速筛查。该方法前处理简单,适用于大批量样品初筛(检测时间约2小时),但可能存在交叉反应,需结合确证方法验证结果。

4. 快速检测技术

荧光免疫层析试纸条和表面增强拉曼光谱(SERS)等新兴技术逐步应用于现场检测。例如,纳米金标记的免疫层析试纸条可在15分钟内完成定性检测,适用于仓储和流通环节的实时监控。

检测仪器与设备

  • HPLC系统:配备荧光检测器或二极管阵列检测器(DAD);
  • 三重四极杆质谱仪:用于LC-MS/MS的高灵敏度分析;
  • 酶标仪:波长范围覆盖450 nm和630 nm,支持ELISA定量;
  • 免疫亲和柱:如OchraTest™或R-Biopharm系列,用于样品净化;
  • 辅助设备:均质器、离心机、氮吹仪及固相萃取装置。

检测标准与法规

国际食品法典委员会(CAC)规定谷物中OTA限量为5 μg/kg,欧盟则对葡萄酒设定2 μg/kg的严格标准。中国《食品安家标准》(GB 2761-2017)明确谷物及其制品中OTA限量范围为3-5 μg/kg。检测方法需符合GB 5009.96-2016(HPLC法)或SN/T 1746-2006(免疫亲和柱净化-荧光法)等标准。

结论

赭曲霉素检测技术正朝着高灵敏度、高通量和便捷化方向发展。传统方法(如HPLC与LC-MS/MS)凭借高准确性仍是实验室主流选择,而快速检测技术为现场筛查提供了有效补充。未来,随着纳米材料与生物传感技术的突破,多毒素同步检测与即时诊断(POCT)将成为提升食品安全监管效率的关键。建议检测机构根据样品类型、通量需求及预算条件,选择适宜的技术组合,并持续关注国际标准更新与技术创新动态。

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